【原理】

本試劑盒系由預(yù)包被鸚鵡熱衣原體抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬鸚鵡熱衣原體抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有鸚鵡熱衣原體抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬鸚鵡熱衣原體抗體。

【試劑盒組成】

序號(hào)	名稱	規(guī)格（96T×1）	規(guī)格（96T×2）
1.	酶標(biāo)板	96T×1	96T×2
2.	酶標(biāo)記物  (紅蓋)	11ml×1	11ml×2
3.	抗體工作液 (藍(lán)蓋)	5.5ml×1	11ml×1
4.	20X濃縮洗滌液	40ml×1	40ml×1
5.	底物液A  (白蓋)	6ml×1	11ml×1
6.	底物液B  (黑蓋)	6ml×1	11ml×1
7.	終止液  (黃蓋)	6ml×1	11ml×1
8.	陽性對照  (紅蓋)	1.0 ml×1	1.5 ml×1
9.	陰性對照  (綠蓋)	1.0 ml×1	1.5 ml×1
10.	蓋板膜	1張	2張
11.	自封袋	1個(gè)	1個(gè)
12.	說明書	1份	1份

人甲肟前列腺素D2（PGD2-MOX）試劑盒【儲(chǔ)存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。

【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。
【樣品準(zhǔn)備】

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

【檢驗(yàn)方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物50μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。

【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對照≤0.15，陽性對照≥0.5。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1.C.O（臨界值）=2.1×陰性對照孔均值（陰性對照孔均值低于0.08時(shí)以0.08計(jì)算）。

2.樣品A值≥C.O為陽性；樣品A值＜C.O為陰性。

【試驗(yàn)方法的局限性】

該試驗(yàn)僅作為定性檢測豬鸚鵡熱衣原體抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估。

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